体育科学

作者：李铁瑛,张缨,

关键词：apelin,AMPK,有氧运动,线粒体,骨骼肌,

目的:探讨有氧运动训练补充apelin对骨骼肌AMPK活化及线粒体能量代谢的影响。方法:1) 细胞实验部分采用小鼠骨骼肌C2C12细胞系作为研究对象, 将靶向AMPKα基因的小干扰RNA (AMPKαsi RNA) 或阴性对照小干扰RNA (Control siRNA) 通过脂质体介导转染细胞。转染48 h后, 进行6 h的饥饿处理, 而后在完全培养基中加入apelin-13 (100nmol/L) 或者同体积的PBS与细胞孵育6h。按转染si RNA和加apelin-13情况, 实验分为Control si RNA+PBS组、ControlsiRNA+apelin组、AMPKsiRNA+PBS组与AMPKsi RNA+apelin组。完成干预后, 采用Seahorse细胞能量代谢分析系统, 测定细胞线粒体基础呼吸、ATP生成和呼吸功能变化。2) 动物实验部分采用C57BL/6J小鼠做为研究对象, 将40只小鼠随机分为安静未注射组、安静注射apelin组、运动未注射组和运动注射apelin组, 每组10只。注射apelin组小鼠连续4周腹腔注射apelin-13 (0.1μmol/kg体重/天) 。运动组采用75%左右最大摄氧量强度 (1~2周坡度5?, 速度15m/min;3~4周坡度5?, 速度20m/min) 、1h/天、6天/周、持续4周的跑台运动。最后一次运动后休息48h, 脱颈处死, 取两侧股四头肌。WesternBlotting测定骨骼肌apelin、APJ、AMPKα、 p-AMPKα (Thr172) 和COXⅣ蛋白表达。结果:1) 细胞实验, ControlsiRNA+apelin组与Control si RNA+PBS组相比, 细胞基础呼吸率、线粒体ATP生成和最大呼吸率均显著增加;而AMPKsi RNA+apelin组与ControlsiRNA+apelin组相比, 线粒体ATP生成和最大呼吸率显著降低。2) 动物实验, 安静注射apelin组与安静未注射组相比、运动注射apelin组与运动未注射组相比, 小鼠骨骼肌apelin、APJ、COXⅣ蛋白表达和pAMPKα/AMPKα比值均显著增加。结论:外源性补充apelin可显著增加C2C12细胞AMPK介导的线粒体呼吸功能, 并提高有氧运动训练小鼠骨骼肌apelin/APJ、AMPKα磷酸化和COXIV蛋白表达, 提示, 有氧运动训练补充apelin可能对骨骼肌的apelin-AMPK通路及其介导的线粒体能量代谢有一定的积极促进作用。

来源：2019年第1期

《体育科学》期刊编辑部

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