体育科学

作者：孙景权,严翊,李松波,谢敏豪,

关键词：运动,乳酸,GPR81,骨骼肌,脂滴合成,

目的:旨在观察乳酸/GPR81信号通路是否参与调节电脉冲刺激 (electricalpulsestimulation, EPS) 诱发C2C12肌管细胞收缩诱导甘油三酯 (triglyceride, TG) 堆积的过程。方法:首先用乳酸处理C2C12肌管细胞, 比色法检测细胞中TG含量, WesternBlot方法检测CREB、pCREB和β-actin蛋白含量;然后采用两种EPS方案 (30 V 0.5 Hz 2 ms和30 V 1 Hz 2 ms) 使C2C12肌管细胞收缩, 比色法检测细胞中乳酸含量, 化学发光法检测细胞中ATP含量, RT-PCR法检测MyHCI、MyHCIIa、MyHCIIb和MyHCIIx等m RNA含量;随后观察EPS处理后不同时间点C2C12肌管细胞中TG含量的变化, 以建立EPS诱发的C2C12肌管细胞TG堆积模型;最后使用GPR81抑制剂3-OBA处理细胞, 将C2C12肌管细胞分为6组 (n=6) :对照组、30 V 0.5 Hz 2 ms组、30 V 1 Hz 2 ms组、3-OBA组、3-OBA+30 V 0.5 Hz 2 ms组和3-OBA+30 V 1 Hz 2 ms组, 比色法检测细胞内TG含量。结果:1) 与对照组相比, 乳酸显著增加C2C12肌管细胞中TG含量 (P<0.05) 并显著降低p CREB的蛋白含量 (P<0.01) ;2) 与未电刺激组相比, 两种EPS方案均显著增加肌管细胞中乳酸含量 (P<0.05) , 而显著降低细胞中ATP含量 (P<0.01) ;同时, 两组MyHCI和MyHCIIb mRNA含量均显著增加 (P<0.05) , 而MyHCIIa和MyHCIIx mRNA含量变化不明显 (P>0.05) ;在电刺激后36h, 细胞中TG含量均显著增加 (P<0.05) , 而电刺激后12h和24h肌管细胞中TG含量未出现显著变化 (P>0.05) ;3) 与未刺激组相比, 30 V 0.5 Hz 2 ms组C2C12肌管细胞中TG含量出现增加趋势 (P=0.052) , 当使用3-OBA处理细胞后, 这一现象无显著变化 (P>0.05) ;而30V1Hz2ms组TG含量出现非常显著增加 (P<0.01) , 当使用3-OBA处理后, 这一作用得到显著减弱 (P<0.05) 。结论:长时间的EPS能够诱导肌管细胞收缩, 增加乳酸和TG含量。乳酸/GPR81信号通路参与调节EPS诱发C2C12肌管细胞收缩诱导TG堆积的过程是骨骼肌细胞收缩诱导能源物质脂滴增加的分子机制之一。

来源：2019年第3期

《体育科学》期刊编辑部

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